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米诺环素对压力作用下体外培养神经细胞凋亡的抑制 |
刘清,张虹,李贵刚 |
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The inhibition of minocycline to pressure-induced apoptosis of retinal neurons cultured in vitro |
Department of Ophthalmology, Tongji Hospital, Tongji Medical College, Huazhong University of Science and Technology,Wuhan China, 430030 |
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摘要 目的 在开放式压力控制培养系统作用下体外培养大鼠视网膜神经细胞(retinal neurons,RNs),观察米诺环素对其活性及凋亡的影响,并进一步探讨其对受损RNs保护的可能机制.方法 采用出生0~3 d的Sprague Dawley(SD)大鼠视网膜神经细胞体外混合培养,制备RNs加压培养模型.通过细胞形态学观察、四唑盐(MTT)比色法测定细胞活力、吖啶橙/溴化乙锭(AO/EB)染色法检测细胞的凋亡率来观察米诺环素对上述损伤细胞的保护及治疗作用,以及应用免疫细胞化学染色法,观察诱导型一氧化氮合酶(iNOS)和半胱天冬酶-3(caspase-3)表达的改变.结果 加压培养后,在倒置显微镜下RNs与对照组相比形态改变较明显,细胞活力降低,大量细胞发生凋亡(占53.93%),而米诺环素治疗组(20 μmol/L)细胞则形态改善,活力显著增高,凋亡数目减少(占17.29%),差异具有显著性(P<0.05).免疫细胞化学染色法示米诺环素治疗组细胞内iNOS和caspase-3表达较加压损伤组减少.结论 一定剂量的米诺环素在体外可有效抑制压力引起的大鼠视网膜神经细胞损伤及凋亡,抑制iNOS和caspase-3的表达可能是其潜在作用机制.
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关键词 :
米诺环素/药理学,
视网膜神经细胞/药物作用,
压力知识脉络凋亡,
青光眼
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